BI-EIA-GONADOTROPIN-LH Âसैंडविच विधि के सिद्धांत पर आधारित एक-चरणीय इम्यूनोपरख है। परख प्रणाली बरकरार एलएच अणु पर एक विशिष्ट एंटीजेनिक निर्धारक के खिलाफ निर्देशित एक उच्च आत्मीयता और विशिष्टता मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (एंजाइम संयुग्मित और स्थिर) का उपयोग करती है। परीक्षण नमूने को दो एंटीबॉडी के साथ एक साथ प्रतिक्रिया करने की अनुमति दी जाती है, जिसके परिणामस्वरूप एलएच अणु ठोस चरण और एंजाइम-लिंक्ड एंटीबॉडी के बीच सैंडविच हो जाते हैं। ऊष्मायन के बाद, अनबाउंड लेबल वाले एंटीबॉडी को हटाने के लिए कुओं को वॉशिंग बफर से धोया जाता है। टीएमबी-सब्सट्रेट का एक समाधान जोड़ा जाता है और ऊष्मायन किया जाता है, जिसके परिणामस्वरूप नीला रंग विकसित होता है। स्टॉपिंग रिएजेंट मिलाने से रंग का विकास रुक जाता है, जिससे रंग पीला हो जाता है। एलएच की सांद्रता परीक्षण नमूने की रंग तीव्रता के सीधे आनुपातिक होती है। अवशोषण को 450 एनएम पर स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से मापा जाता है